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全自动生化分析仪ADVIA2400校准方法探讨

目前还没有全自动生化分析仪的校准规范或检定规程,只能参照JJG464-2011《半自动生化分析仪检定规程》和YY/T0654-2008《全自动生化分析仪》等技术标准进行性能评价。本文主要采用ADVIA2400自带杯空白程序,探讨了杂散光、吸光度示值误差、吸光度重复性、线性示值误差等计量特性指标的校准方法

一、原理

全自动生化分析仪的工作原理基于朗伯-比尔定律阐述为:光被透明介质吸收的比例与入射光的强度无关;在光程上每等厚层介质吸收相同比例值的光。

朗伯-比尔定律数学表达式:A=-lgτ=abc

式中:A———吸光度;τ———透射比;a———吸光系数;b———光程;c———浓度。

表1 BW2025-1和BW2025-2标准物质数据

表1 BW2025-1和BW2025-2标准物质数据

表2 吸光度标准值转换

表2 吸光度标准值转换

二、参考标准

JJG464-2011和YY/T0654-2008。

三、标准物质

采用中国计量科学研究院生产的标准物质:

BW2025-1生化分析仪校准用溶液标准物质———吸光度。

BW2025-2生化分析仪校准用溶液标准物质———杂散光、线性及交叉污染。

其材料名称、特性量值及不确定度如表1所示。

西门子生化分析仪有其特殊性,用杯空白进行校准时因其光程与标准物质定值时光程不同而不能直接使用标准物质的标准值。标准物质标准值是采用10mm光程在340nm处测得的吸光度值,西门子生化ADVIA2400采用的是6mm光程,标准值存在一个换算。依据朗伯-比尔定律将表1中的吸光度标准值转换成ADVIA2400的仪器6mm光程所对应的吸光度标准值,如表2所示。

四、校准方法与校准结果

1. 准备工作

(1)打开计算机主机电源,进入登录界面。

(2)将仪器开关转至⊙状态。仪器进入开机自检状态。

(3)在计算机界面。选择⊙NEW START输入登录名和密码(advia),点击OK登录。点击INITIALIZE(复位)使仪器恢复待机状态。

(4)检查系统状态:点击Maint.→System Monitor,确认仪器各项系统参数正常。

(5)开机清洗:在CTT51#放置10m L去离子水,在RTT1、2的50#放置去离子水。点击WASH→选择⊙WASH3,Cycles循环次数设为次→Execute。

表3 杯空白原始数据

表3 杯空白原始数据

2. 开始测试

(1)本次校准方法采用ADVIA2400保养程序中的比色杯空白检测:仪器做一次比色杯空白检测,点击Maint→User Maint→[cell blank meas.Check]→Start CB并保存杯空白数据,数据读取点击Request→Realtime Monitor或点击Request→Test result Monitor。

(2)拆下反应盘冲洗站并安置好,用夹子夹好最好再放置在一个桶内,防止液体泄漏。

(3)打开反应盘盖,选取一把带100μL的移液枪,在反应杯中加入5杯1-1溶液,3杯1-2溶液,1杯2溶液,3-1~3-5溶液各3杯并记下杯子号。

(4)重新做比色杯空白,重复四、2.(1)过程,本次加标准溶液的杯空白值,不能保存为仪器空白。

(5)恢复冲洗站,选择WASH清洗反应杯。

3. 数据处理

测试完成后,数据读取点击Request→Realtime Monitor或点击Request→Test resultMonitor;通过杯子号寻找第二次加标物的杯空白值,在波长340nm时的1-1、1-2、2的吸光度值以及波长505nm的3-1~3-5的吸光度值并记录作为测量值;接着依据杯子号找第一次的相应波长下的比色杯空白值。所测标准物质吸光度值=加标物杯空白吸光度值-杯空白吸光度值。结果如表3所示。

五、结果分析

1. 杂散光:2.8689符合YY/T0654-2008中不小于2.3的要求。

2. 吸光度示值误差:结果如表4所示。

符合YY/T0654-2008中允许误差的要求。

3. 吸光度重复性:结果如表5所示。

符合JJG464-2011中吸光度重复性的要求。

4. 线性示值误差:结果如表6所示。

表4 吸光度示值误差结果

表4 吸光度示值误差结果

表5 吸光度重复性结果

表5 吸光度重复性结果

表6 线性示值误差结果

表6 线性示值误差结果

符合JJG464-2011中线性示值误差的要求。

六、结束语

西门子ADVIA2400生化分析仪带预稀释功能,单纯用普通的校准方法很难准确判断仪器的好坏。而杯空白的校准方法对吸光度示值误差来说,比较准确,避免了预稀释系统、清洗系统、加样系统的影响。此校准方法同样适用于日立、贝克曼库尔特等品牌的全自动生化分析仪,只不过操作略显不同,界面更加简单,没有换算上的麻烦。如果全项目校准,推荐杯空白和普通校准方法相结合。现有检定规程结合行业标准对全自动生化分析仪的计量校准基本满足了校准要求,但是局限性明显,掩饰不住缺少检定规程、校准规范的遗憾。

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